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小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)原代培養(yǎng)在生命科學(xué)研究中用途廣泛,主要包括以下幾個(gè)方向:
細(xì)胞保種與細(xì)胞庫(kù)建立
原代MEF可作為細(xì)胞保種體系,用于長(zhǎng)期保存細(xì)胞株并在需要時(shí)復(fù)蘇,保證實(shí)驗(yàn)材料的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。
胚胎干細(xì)胞(ES)/誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)飼養(yǎng)層
MEF能夠分泌多種維持多能性的生長(zhǎng)因子,并提供細(xì)胞基質(zhì),常被用作ES或iPSC的飼養(yǎng)層,以維持其未分化狀態(tài)和自我更新能力。
基因功能與基因編輯研究
通過(guò)轉(zhuǎn)染、CRISPR/Cas9等技術(shù),MEF可用于驗(yàn)證基因敲除、過(guò)表達(dá)或突變的功能,幫助構(gòu)建轉(zhuǎn)基因小鼠模型或解析信號(hào)通路。
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)
由于MEF易于轉(zhuǎn)染且增殖快,常用于報(bào)告基因、熒光標(biāo)記、蛋白相互作用、信號(hào)通路活性等分子實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)。
基因治療相關(guān)研究
MEF可作為病毒包裝細(xì)胞(如慢病毒、腺病毒)或基因遞送系統(tǒng)的生產(chǎn)平臺(tái),為基因治療載體的制備提供原料。
藥物篩選與毒理學(xué)評(píng)估
通過(guò)在MEF上進(jìn)行化合物處理或共培養(yǎng)模型(如免疫細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞),可評(píng)估藥物的細(xì)胞毒性、代謝活性及作用機(jī)制。
細(xì)胞老化與衰老機(jī)制研究
原代MEF的有限增殖特性使其成為研究細(xì)胞衰老、復(fù)制極限及相關(guān)分子標(biāo)記的理想模型。
共培養(yǎng)模型
將MEF與其他細(xì)胞類(lèi)型(如神經(jīng)元、心肌細(xì)胞)共培養(yǎng),可模擬組織微環(huán)境,研究細(xì)胞間相互作用和信號(hào)傳遞。
其他應(yīng)用
作為轉(zhuǎn)基因小鼠的飼養(yǎng)層細(xì)胞,支持胚胎移植和胚胎發(fā)育研究。
用于高通量篩選平臺(tái),結(jié)合自動(dòng)化培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行大規(guī)模實(shí)驗(yàn)。
綜上,MEF原代培養(yǎng)因其易獲取、增殖活躍、能夠提供天然細(xì)胞基質(zhì)和分泌多種生長(zhǎng)因子,已成為細(xì)胞生物學(xué)、干細(xì)胞學(xué)、基因工程、藥物研發(fā)等多個(gè)研究領(lǐng)域的基礎(chǔ)工具。
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