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乙醇酸氧化酶(GO)檢測試劑盒

簡要描述:乙醇酸氧化酶(GO)檢測試劑盒,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

  • 產品型號:TE0531
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-11-01
  • 訪  問  量:339

詳細介紹

天然果膠類物質以原果膠、果膠(Pectin)、果膠酸的形態(tài)廣泛存在于植物的果實、根、莖、葉中,是細胞壁的一種組成成分,

它們伴隨纖維素而存在,構成相鄰細胞中間層粘結物,使植物組織細胞緊緊黏結在一起。果膠酶(Pectinase)是一類分解果膠

質酶類的總稱,實質是多聚半乳糖醛酸水解酶,包括原果膠酶,果膠酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶四大類,

廣泛存在于植物果實和微生物中,主要用于食品、釀酒、環(huán)保、醫(yī)藥、紡織及日化用品行業(yè)。


乙醇酸氧化酶(GO)檢測試劑盒檢測原理是果膠酶水解果膠生成β-半乳糖醛酸,與二硝基水楊酸(DNS)反應形成有

色化合物,該化合物呈色強度與半乳糖醛酸濃度成正比,于酶標儀540nm處測定吸光度,通過與標準曲線比較計算出樣品中

果膠酶活性,主要用于定量檢測植物組織或果實中果膠酶,反應顏色越深,吸光度越大,果膠酶的活性越強,

該50T試劑盒可以檢測約23~24次樣本。該試盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。


操作步驟(僅供參考)

自備材料:

1、蒸餾水

2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

3、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋、酶標儀、酶標板


操作步驟(僅供參考):

1、準備樣品∶

①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,4℃ 10000r/min

離心15~20min,留取上清液,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測。

②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于苯丙解氨的檢測。

③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,

-20℃凍存,用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸餾水或PAL

Lysis Buffer稀釋進行恰當的稀釋。

2、PAL加樣∶

取96孔板,按照下表設置對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并

注意避免產生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行孔,

求平均值。

加入物(μl)對照孔測定孔

蒸餾水150100

待測樣本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL檢測︰

以對照孔為對照(調零),酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為   A測定0);40℃準確孵育1h,立即加入10μl PAL終止

液終止反應(備選方案),以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。

注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟,可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定

孔的吸光度。

注意事項∶

1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,同時需避免反復凍融。

2、獲得上清液為PAL酶液,應盡快檢測,亦可-20°℃保存。

3、如果沒有可測定紫外區(qū)的酶標儀和酶標板,也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿,但應注意比色杯的最小檢測體積。

4、每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。




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